هدف نسبت سرم به گلبول قرمز خون مي تواند به شدت روي حساسيت آزمايش و قدرت آگلوتيناسيون اثربگذارد. سوسپانسيون ۳درصد معرفي است كه در روشهاي سرولوژيك بكار برده مي شود.تهيه سوسپانسيون نهايي3 درصد به صورت دقيق الزامي نيست ، بلكه سوسپانسيون نزديك به 3 درصد (5-2 درصد) مي تواند نسبت لازم سرم به گلبول را در بيشتر رو شها فراهم آورده و تعداد كافي و مناسب از گلبول قرمز خون را براي خواندن و درجه بندي واكنش در دسترس قراردهد.

موارد کاربرد :
تعيين گروه خون
انجام کراس مچ
انجام آزمایش کومبس نمونه :
نمونه خون كامل حاوي EDTA

نکات ایمنی :
از آنجا که آزمایش برروی نمونه های انسانی انجام میشود باید کلیه آنها را بالقوه آلوده فرض نمود


تجهیزات و مواد مورد نیاز قبل از انجام کار :
لوله آزمايش 75*12
پيپت یا پیپتور
سمپلر
سالين 0.9 درصد
سروفیوژ
جالوله اي
آينه مقعر
منبع روشنايي (چراغ مطالعه)
نمونه سوسپانسيون خون ۳درصد تجاری ( کنترل )

مراحل اجرایی کار :
جهت تهيه ۱۰ ميلي ليتر از سوسپانسيون ۳درصد گلبول قرمز خون مراحل ذيل را انجام دهيد: 1- حداقل ۱ميلي ليتر از خون كامل را به يك لوله ۱۰ ميلي ليتري انتقال دهيد. 2- به گلبولهاي قرمز خون نرمال سالين اضافه نموده و به مدت ۱ الي ۳ دقيقه سانتريفوژ نماييد . اين مرحله را ۲ تا ۳ بار تكرار نماييد. محلول نهائي بايد كاملاً شفاف و گلبول قرمز در انتهاي لوله جمع شده باشند.محلول سالين فوقاني supernatant را كاملاً دور بريزيد. 3- مقدار 0.3 ميلي ليتر از گلبولهاي قرمز متراكم شسته شده را به لولهاي حاوي 9.7 ميلي ليتر سالين 0.9 درصد انتقال دهيد

با استفاده از پارافيلم لوله را پوشش دهيد . با چند بار سروته كردن لوله، گلبولهاي قرمز خون را با سالين 0.9 درصد كاملاً مخلوط نماييد. سوسپانسیون بدست آمده دارای غلظت 3 درصد می باشد

كنترل كيفي :
جهت كنترل چشمي رنگ و تراكم سوسپانسيون ، مقداري از سوسپانسيون تهيه شده را به لوله 75 * ۱۲ ميلي متر انتقال دهيد.سپس حجم مشابه اي از نمونه سوسپانسيون ۳درصد تجاری (کنترل) را به لوله 75 *۱۲ ميلي متر ديگري انتقال دهيد. جهت مقايسه ، لوله ها را مقابل منبع نور قرارداده و بررسي نماييد.

يا
به منظور مقايسه مقدار تجمع گلبول قرمز سوسپانسيون ۳درصد تهيه شده ، يك قطره از اين سوسپانسيون را به لوله 75*12 ميلي متر انتقال دهيد . به صورت مشابه يك قطره ا ز نمونه سوسپانسيون ۳درصد تجاری (کنترل) را به لوله 75*12 ميلي متر ديگري انتقال دهيد.لوله ها را به مدت 30-15 ثانیه سانتریفیوژ نماييد
اندازه دو رسوب گلبول قرمز خون با مشاهده در آينه مقعر بايد مشابه باشد.

نكات مهم :
1- در صورت عدم وجود نمونه خون كامل EDTA استفاده از خون لخته بلامانع است . 2- سوسپانسيون تهيه شده را فقط در روز آماده سازي استفاده نماييد . جهت نگهداری روزانه از يخچال آزمايشگاه در دماي 2-8 درجه سانتيگراد استفاده شود. 3- جهت تهيه حجم كمتر ، مقدار سالين 0.9 درصد و گلبول قرمز خون را به تناسب انتخا ب نماييد 4- تهيه سوسپانسيون گلبولي غليظ يا رقيق ميتواند منجر به پاسخ مثبت يا منفي كاذب در آزمايش گردد